400-606-0451
原因一:這(zhè)可(kě)能是因爲您在構建載體的(de)時(shí)候插入片段是非定向的(de),這(zhè)種情況一般在T/A克隆的(de)時(shí)候比較常見。
TE溶液中的(de)EDTA對(duì)PCR反應有一定的(de)抑制作用(yòng),實際上DNA測序是在PCR反應過程中進行的(de),想要得(de)到一個(gè)理(lǐ)想的(de)測序結果,首先需要一個(gè)最佳的(de)PCR反應條件。因此,在準備DNA測序樣品時(shí),建議(yì)您使用(yòng)滅菌水(shuǐ)進行溶解。
這(zhè)是因爲體系中殘存的(de)染料單體幹擾測序反應形成的(de)雙峰所緻;此外,測序初始階段電壓不穩定,導緻引物(wù)後面有20-50bp的(de)堿基讀不清楚。
pcr産物(wù):如果以PCR産物(wù)的(de)形式送樣,建議(yì)将PCR産物(wù)切膠回收後再送測序,這(zhè)樣可(kě)以在一定程度上避免重疊峰的(de)出現。